蛋白質(zhì)分離純化步驟（二） 2.4.3. 親和層析 親和層析（affinity-chromatography）分離技術(shù)是根據(jù)許多蛋白質(zhì)對(duì)特定的化學(xué)基團(tuán)具有專一性結(jié)合的原理。這些能被生物大分子如蛋白質(zhì)所識(shí)別并與之結(jié)合的基團(tuán)稱為配基或配體（ligand）。親和層析是一種極有效的分離純化蛋白質(zhì)的方法，北京樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)廠家報(bào)價(jià)。例如酶對(duì)它的底物具有特殊的親和力；抗原和抗體互為配基。以伴刀豆球蛋白A（concanavalin A）的分離純化為例，由于該蛋白對(duì)葡萄糖有專一性親和吸附，因此可把葡萄糖通過(guò)適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)反應(yīng)共價(jià)地連接到像瓊脂糖凝膠一類的載體表面上。為了防止載體表面的空間位阻影響待分離的蛋白質(zhì)大分子與其配基的結(jié)合，在配基和載體之間往往插入一段所謂的連接臂（或稱為間隔臂，spacerarm），使配體與載體之間保持足夠的距離。 將這種多糖顆粒裝入一定規(guī)格的玻璃管中就制成了一根親和層析柱。當(dāng)含有伴刀豆球蛋白的提取液加到層析柱的上部，并沿柱從上往下過(guò)時(shí)，待純化的蛋白質(zhì)與其特異性配基結(jié)合而被吸附到柱上，其他蛋白因不能與葡萄糖配基結(jié)合將通過(guò)柱子而流出（圖2-28a）。然后采用一定的洗脫條件，北京樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)廠家報(bào)價(jià)，北京樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)廠家報(bào)價(jià)，如濃的葡萄糖溶液進(jìn)行洗脫，即可把該蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)，達(dá)到與其它蛋白質(zhì)分離的目的。

三、蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定 3.2 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定分子量 蛋白質(zhì)在普通聚丙烯酰胺凝膠中的電泳速度取決于蛋白質(zhì)分子大小、所帶電荷的量以及分子形狀。而SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳與此不同的是在樣品及電泳緩沖液中加入了十二烷基***鈉（sodium dodecylsulfate,SDS）。SDS是一種陰離子去污劑，可使蛋白質(zhì)變性并解離成亞基。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)樣品中加入SDS（一般加入量為0.1％）后，SDS與蛋白質(zhì)分子結(jié)合，使蛋白質(zhì)分子帶上大量的負(fù)電荷，這些電荷量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)蛋白質(zhì)分子原來(lái)所帶的電荷量，因而掩蓋了不同蛋白質(zhì)之間的電荷差異。所有結(jié)合SDS的蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物的形狀近似于長(zhǎng)的橢園棒，它們的短軸是恒定的，而長(zhǎng)軸與蛋白質(zhì)分子量的大小成正比。這樣，消除了蛋白質(zhì)之間原有的電荷和形狀的差異，電泳的速度只取決于蛋白質(zhì)分子量的大小。 進(jìn)行凝膠電泳時(shí)，常常用一種染料作前沿物質(zhì)，蛋白質(zhì)分子在電泳中的移動(dòng)距離和前沿物質(zhì)移動(dòng)的距離之比值稱為相對(duì)遷移率，相對(duì)遷移率和分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)成直線關(guān)系。以標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)和其相對(duì)遷移率作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。將未知蛋白質(zhì)在同樣條件下電泳，根據(jù)測(cè)得的樣品相對(duì)遷移率，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上便可查出其分子量。

Inscinstech 是專注于化學(xué)分析儀器及設(shè)備的研發(fā)，生產(chǎn)及銷售的高新技術(shù)企業(yè)。擁有數(shù)量眾多的專利及計(jì)算機(jī)軟件著作權(quán)。公司在中國(guó)蘇州和美國(guó)洛杉磯分別建有營(yíng)銷中心，致力于為全球客戶提供高品質(zhì)的生物分離設(shè)備及化學(xué)分析儀器，降低客戶運(yùn)營(yíng)成本，為客戶創(chuàng)造價(jià)值。



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公司在中國(guó)蘇州及美國(guó)波士頓建有研發(fā)中心，建有完善的產(chǎn)品研發(fā)體系，擁有國(guó)際水準(zhǔn)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)。公司技術(shù)團(tuán)隊(duì)具有十余年的實(shí)驗(yàn)室樣品前處理、色譜、光譜及質(zhì)譜分析儀器、自動(dòng)化設(shè)備、機(jī)器視覺技術(shù)的研發(fā)、工程化、產(chǎn)業(yè)化經(jīng)驗(yàn)，為客戶提供從樣品分離，前處理到實(shí)驗(yàn)室化學(xué)分析的***智能化解決方案。



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公司在美國(guó)波士頓及中國(guó)東莞設(shè)有生產(chǎn)制造基地，擁有世界前列的生產(chǎn)工藝及嚴(yán)格的質(zhì)量保證體系。公司在東莞長(zhǎng)安設(shè)立了壓鑄模具制造，精密零件加工的制造基地，擁有高精密的五軸車銑復(fù)合加工中心，精密數(shù)控車床，二次元檢測(cè)儀，高精度三坐標(biāo)測(cè)量?jī)x等高端制造設(shè)備和品質(zhì)檢驗(yàn)儀器。制造基地通過(guò)了ISO9001質(zhì)量管理體系認(rèn)證及GJB9001C-2017武器裝備質(zhì)量管理體系認(rèn)證。



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