蛋白質(zhì)分離純化步驟（二） 2.4.3. 親和層析 親和層析（affinity-chromatography）分離技術(shù)是根據(jù)許多蛋白質(zhì)對(duì)特定的化學(xué)基團(tuán)具有專一性結(jié)合的原理。這些能被生物大分子如蛋白質(zhì)所識(shí)別并與之結(jié)合的基團(tuán)稱為配基或配體（ligand）。親和層析是一種極有效的分離純化蛋白質(zhì)的方法。例如酶對(duì)它的底物具有特殊的親和力；抗原和抗體互為配基。以伴刀豆球蛋白A（concanavalin A）的分離純化為例，由于該蛋白對(duì)葡萄糖有專一性親和吸附，因此可把葡萄糖通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)反應(yīng)共價(jià)地連接到像瓊脂糖凝膠一類的載體表面上。為了防止載體表面的空間位阻影響待分離的蛋白質(zhì)大分子與其配基的結(jié)合，在配基和載體之間往往插入一段所謂的連接臂（或稱為間隔臂，spacerarm），使配體與載體之間保持足夠的距離。 將這種多糖顆粒裝入一定規(guī)格的玻璃管中就制成了一根親和層析柱。當(dāng)含有伴刀豆球蛋白的提取液加到層析柱的上部，樣品前處理樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)，樣品前處理樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)，并沿柱從上往下過時(shí)，待純化的蛋白質(zhì)與其特異性配基結(jié)合而被吸附到柱上，其他蛋白因不能與葡萄糖配基結(jié)合將通過柱子而流出（圖2-28a）。然后采用一定的洗脫條件，如濃的葡萄糖溶液進(jìn)行洗脫，樣品前處理樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)，即可把該蛋白質(zhì)洗脫下來，達(dá)到與其它蛋白質(zhì)分離的目的。

蛋白質(zhì)分離純化步驟（二） 2.4.2 纖維素柱層析法 該法是利用蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)作為分離的基礎(chǔ)。離子交換纖維素（cellulose ion-exchanger）是人工合成的纖維素衍生物，它具有松散的親水性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，有較大的表面積，使蛋白質(zhì)大分子可以自由通過。因此常用于蛋白質(zhì)的分離。 （1）羧甲基纖維素（CM-纖維素） 在纖維素顆粒上帶有羧甲基基團(tuán)。在中性pH條件下，羧甲基上的質(zhì)子可解離下來（圖2-27a），而溶液中帶正電荷的蛋白質(zhì)分子可與纖維素顆粒上的羧甲基負(fù)電荷結(jié)合?？山粨Q的基團(tuán)帶正電，因此是一種陽離子交換劑。蛋白質(zhì)與離子交換纖維素之間結(jié)合能力的大小取決于彼此間相反電荷基團(tuán)之間靜電吸引。 (2）二乙氨基乙基纖維素（DEAE-纖維素） 在中性pH條件下，它含有帶正電荷的基團(tuán)，可與溶液中的帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合，可交換的基團(tuán)帶負(fù)電荷，因此是一種陰離子交換劑。當(dāng)某一蛋白質(zhì)混合溶液通過裝有DEAE-纖維素的層析柱時(shí)，帶正電荷的蛋白質(zhì)不能結(jié)合而隨著洗脫液的流動(dòng)先被洗脫下來。帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)將被結(jié)合到柱上。結(jié)合力取決于彼此相反電荷基團(tuán)間的靜電吸引。然后選用一定pH和離子強(qiáng)度的緩沖液進(jìn)行洗脫，改變蛋白質(zhì)分子所帶的靜電荷，依次從層析柱流出達(dá)到相互分離的目的。

Inscinstech 是專注于化學(xué)分析儀器及設(shè)備的研發(fā)，生產(chǎn)及銷售的高新技術(shù)企業(yè)。擁有數(shù)量眾多的專利及計(jì)算機(jī)軟件著作權(quán)。公司在中國(guó)蘇州和美國(guó)洛杉磯分別建有營(yíng)銷中心，致力于為全球客戶提供高品質(zhì)的生物分離設(shè)備及化學(xué)分析儀器，降低客戶運(yùn)營(yíng)成本，為客戶創(chuàng)造價(jià)值。



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公司在中國(guó)蘇州及美國(guó)波士頓建有研發(fā)中心，建有完善的產(chǎn)品研發(fā)體系，擁有國(guó)際水準(zhǔn)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)。公司技術(shù)團(tuán)隊(duì)具有十余年的實(shí)驗(yàn)室樣品前處理、色譜、光譜及質(zhì)譜分析儀器、自動(dòng)化設(shè)備、機(jī)器視覺技術(shù)的研發(fā)、工程化、產(chǎn)業(yè)化經(jīng)驗(yàn)，為客戶提供從樣品分離，前處理到實(shí)驗(yàn)室化學(xué)分析的***智能化解決方案。



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公司在美國(guó)波士頓及中國(guó)東莞設(shè)有生產(chǎn)制造基地，擁有世界前列的生產(chǎn)工藝及嚴(yán)格的質(zhì)量保證體系。公司在東莞長(zhǎng)安設(shè)立了壓鑄模具制造，精密零件加工的制造基地，擁有高精密的五軸車銑復(fù)合加工中心，精密數(shù)控車床，二次元檢測(cè)儀，高精度三坐標(biāo)測(cè)量?jī)x等高端制造設(shè)備和品質(zhì)檢驗(yàn)儀器。制造基地通過了ISO9001質(zhì)量管理體系認(rèn)證及GJB9001C-2017武器裝備質(zhì)量管理體系認(rèn)證。



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