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    思特進(多圖)-亞細胞定位

  • 作者:武漢思特進科技發(fā)展有限公司 2019-12-18 08:20 500
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    武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。




    由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因為中心,探討致病相關(guān)基因的種類及其功能,生理小種和致病基因的關(guān)系,致病基因的遺傳分離和在群體中的轉(zhuǎn)移規(guī)律等等,能夠為水稻抗瘟性研究和稻瘟病化學防治、生物防治提供理論基礎(chǔ)。 本研究利用在實驗室已經(jīng)建成的根癌農(nóng)介導的稻瘟菌T-DNA插入突變體庫,挑選了7個致病力缺陷的突變體,亞細胞定位,提取基因組DNA,PCR檢測確認T-DNA的插入。利用DW-ACP-PCR(DNA Walking-Annealing Control Primer-PCR)技術(shù)對T-DNA右邊界側(cè)翼序列進行擴增,7個突變體都獲得了特異條帶。對這些特異條帶進行并測序,其中5個測序成功,另外2個測序失敗。將成功的序列與稻瘟菌基因組和NCBI數(shù)據(jù)庫比對,發(fā)現(xiàn)1個為載體pCAMBIA1300序列,4個與稻瘟菌的基因組相似性達93%~99%,認為是T-DNA插入位點的側(cè)翼序列。

    武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。



    目的構(gòu)建通用型植物GFP標簽蛋白表達載體,研究蛋白質(zhì)的細胞內(nèi)定位對蛋白質(zhì)組學和代謝組學等研究的意義。方法構(gòu)建2種GFP標簽蛋白質(zhì)表達載體,分別在GFP的N和C端預留位點,以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結(jié)構(gòu)域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白(Fok I:MCP:Fok I,F(xiàn)MF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細胞核定位信號。利用農(nóng)介導植物瞬時表達侵染本氏和洋蔥表皮細胞,觀察GFP熒光表達情況。結(jié)果成功構(gòu)建了2種融合了目的基因和GFP的表達載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細胞,可在細胞核和細胞質(zhì)中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細胞,只在細胞核中觀察到綠色熒光。結(jié)論該載體系統(tǒng)可運用于研究蛋白質(zhì)在植物細胞中的亞細胞定位,具有簡單、高效和通用性的特點。


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    的發(fā)生及轉(zhuǎn)移是一個多階段、多步驟、多基因參與的過程。尋找參與發(fā)生和轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因并深入研究這些基因在發(fā)展過程中的作用,對于闡明的發(fā)病機制以及診斷、預防和均具有重要意義。我們實驗室為探討發(fā)生及轉(zhuǎn)移的分子機制,在人...


    思特進(多圖)-亞細胞定位由武漢思特進科技發(fā)展有限公司提供。武漢思特進科技發(fā)展有限公司(www.)是湖北 武漢 ,辦公、文教項目合作的翹楚,多年來,公司貫徹執(zhí)行科學管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠實守信的方針,滿足客戶需求。在思特進領(lǐng)導攜全體員工熱情歡迎各界人士垂詢洽談,共創(chuàng)思特進更加美好的未來。


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