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    病原微生物是指可以侵犯人體,在宿主中生長(zhǎng)繁殖、釋放毒性物質(zhì)等引|起機(jī)體不同程度病理變化、發(fā)生感染的微生物,包括、病毒、、、衣原體、支原體等。病原微生物檢測(cè)——血清免疫學(xué)方法:免疫學(xué)技術(shù)是利用特抗原抗體反應(yīng),觀察和研究組織細(xì)胞、特定抗原(抗體)的定性和定量技術(shù)。為了顯示和觀察這種抗原抗體反應(yīng),需要預(yù)先將某種標(biāo)記物結(jié)合到抗體上,借標(biāo)記物的熒光或酶的有色反應(yīng)、放射性或高電子密度,在光鏡或電鏡下進(jìn)行定性、定位或定量研究。各種形式的免疫分析方法如放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)、間接酶聯(lián)免疫吸附(EL ISA)、熒光免疫分析(FIA)、生物發(fā)光免疫分析(BIA)、化學(xué)發(fā)光免疫分析(CIA)等,直接檢測(cè)微生物或通過間接檢測(cè)微生物的成份及微生物代謝產(chǎn)物(如)檢出微生物。各大文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫提供的數(shù)據(jù)顯示,幾乎建立了所有病原體的血清學(xué)檢測(cè)方法,表明該方法也成為了一種實(shí)驗(yàn)室常用的成熟的檢測(cè)技術(shù)。病原微生物檢測(cè)——分子生物學(xué)與免疫學(xué)相結(jié)合的方法:1、免疫PCR:免疫PCR(immuno polymerase chain reaction,IM PCR)是1992年Sano等[16]建立的一種檢測(cè)微量抗原的高靈敏度技術(shù)。該技術(shù)把抗原抗體反應(yīng)的高特和聚合酶鏈反應(yīng)的高敏感性有機(jī)結(jié)合起來,它的基本原理是用一段已知DNA分子標(biāo)記抗體作為探針,用此探針與待測(cè)抗原反應(yīng),PCR擴(kuò)增粘附在抗原抗體復(fù)合物上的這段DNA分子,電泳定性,根據(jù)特PCR產(chǎn)物的有無,來判斷待測(cè)抗原是否存在。目前,國(guó)內(nèi)外報(bào)道的免疫PCR的敏感性一般比現(xiàn)行的EL ISA法高102~105倍。由于PCR產(chǎn)物在抗原量未達(dá)到飽和前與抗原抗體復(fù)合物的量成正比,因此免疫PCR還可用于抗原的半定量試驗(yàn)。2、PCR2EL ISA:PCR2EL ISA法是PCR與EL ISA技術(shù)結(jié)合的檢測(cè)方法。其綜合了PCR,分子雜交,和EL ISA 3種技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)。主要用于檢測(cè)樣品中的特定基因。它引入(或生物素)標(biāo)記的dN TP或引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,利用酶標(biāo)抗抗體(或酶標(biāo)記親和素)進(jìn)行EL ISA檢測(cè),代替了用于常規(guī)PCR產(chǎn)物檢測(cè)的電泳方法,方便快捷,易于處理大量樣品,且其靈敏度比使用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)方法高100倍,當(dāng)有適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)品時(shí),還可進(jìn)行定量測(cè)定。病原微生物檢測(cè)——傳感器技術(shù)和分子診斷技術(shù)相結(jié)合:生物傳感器是將新興的傳感器技術(shù)和分子診斷技術(shù)相結(jié)合而成的一種新技術(shù),是現(xiàn)代診斷發(fā)展的一個(gè)新方向。生物傳感器包含兩部分,即分子識(shí)別器件和換能器。在待測(cè)物、識(shí)別器件以及轉(zhuǎn)換器件之間由一些生物、化學(xué)、生化作用或物理作用過程彼此聯(lián)系。由于生物傳感器檢測(cè)準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),近年來已經(jīng)在許多領(lǐng)域取得了很大的進(jìn)展,在生物分子相互作用、藥物篩選、診斷、食物檢測(cè)等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用。其中中用于病原體檢測(cè)的以DNA生物傳感器為常見。盡管生物傳感器作為一種新的傳感元件近年來得到了很大的發(fā)展,許多光化學(xué)、電化學(xué)以及壓電晶體都相繼在生物傳感器中得到應(yīng)用。與常規(guī)的核酸和蛋白質(zhì)檢測(cè)相比,具有檢測(cè)準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),但由于它存在靈敏度不夠、容易受雜質(zhì)干擾等缺點(diǎn),隨著研究的進(jìn)一步深化和技術(shù)方法的改進(jìn),這些問題將會(huì)得到解決。病原微生物檢測(cè)——生化方法:生化方法檢測(cè)病原微生物實(shí)際上是測(cè)定微生物特酶。由于各種微生物所具有的酶系統(tǒng)不完全相同,對(duì)許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物產(chǎn)生的不同代謝產(chǎn)物來間接檢測(cè)該微生物內(nèi)酶的有無,從而達(dá)到檢測(cè)特定微生物的目的。如沙門氏菌能產(chǎn)生辛酯酶,這一性能是除沙門氏菌外的各屬腸桿菌科所不具備的。該方法是以42甲基傘形酮辛酯(MUCAP)為底物,經(jīng)沙門氏菌的酶降解后,釋放出4MU,在紫外燈下觀察其發(fā)出的藍(lán)色熒光。該方法簡(jiǎn)便易行,從加入底物到紫外燈下觀察到出結(jié)果僅需幾分鐘即可完成。其靈敏度和特分別可達(dá)95%和90%。對(duì)與H2 S(+)反應(yīng)的沙門氏菌該法更為敏感,靈敏度和特均接近。大腸埃希氏菌具β2葡萄糖醛酸酶,但以O(shè)157:H7為代表的腸性大腸埃希氏菌(EHEC)卻不具此酶,故β2葡萄糖醛酸酶陰性已成為初步篩查EHEC的重要特征。白色具脯氨酸肽酶及N2已酰β2D半乳糖苷酶,分別以合適的試劑檢測(cè),兩酶均陽性即為白色。的宗旨是:“用服務(wù)與真誠來換取你的信任與支持,互惠互利,共創(chuàng)雙贏!”我公司愿與各界同仁志士竭誠合作,共創(chuàng)未來!

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