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    韶關病毒抑制率試驗數(shù)據(jù) 華微檢測

  • 作者：廣東省華微檢測股份有限公司 2024-05-10 09:33 130
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    病毒滅活試驗是利用某種有代表性的活病毒及其細胞感染技術，評價各種消毒因子的病毒殺滅效果，驗證消毒因子的病毒滅活能力。
    病毒滅活是指用物理或化學手段殺死病毒，但是不損害它們體內(nèi)有用抗原的方法。滅活病毒，會使病容毒蛋白的結構受到破壞，蛋白不再有生理活性，所以失去感染，致病和繁殖能力，但是常規(guī)的滅活不影響病毒蛋白的一級結構，意思就是病毒蛋白的序列沒有變化。免疫系統(tǒng)對抗原的識別分成兩種，一種是構像表位，一種是線性表位。構象表位意思就是蛋白的三維結構，而線性表位就是蛋白的序列一級結構。T細胞只需要識別線性表位就成接受免疫呈遞細胞給出的信號，引發(fā)免疫反應。所以滅活的病毒具有抗原性，但失去感染力。這個其實是很多疫苗的制造原理。滅活的病毒失去感染活性，但仍有融合活性。用于動物細胞工程中的細胞融合的誘導劑。
    韶關病毒抑制率試驗數(shù)據(jù)
    病毒滅活效果測試：
    主要適用于消毒產(chǎn)品鑒定或日常監(jiān)測。用具有一定代表性的、活的病毒及其細胞感染技術，評價各種用途的消毒因子對測試病毒的殺滅效果。
    試驗器材：
    (1)試驗用病毒株:脊髓灰質(zhì)炎病毒1型(poliovirus- I，PV-I )株;艾滋病病毒1型(HIV-1)美國株。
    (2)宿主細胞:可采用VERO細胞系、BGM細胞、Hela細胞系或FL細胞系，作為PV-1的測試細胞。用含有人T淋巴細胞白血病病毒1型(human T cell leukemiavirus 1, HTLV-1) 基因的人淋巴細胞(株)作為HIV-1的測試細胞。
    (3)細胞培養(yǎng)瓶與96孔培養(yǎng)板。
    (4)恒溫水浴箱等。
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    病毒滅活效果測試：
    病毒消殺產(chǎn)品檢測在對消毒產(chǎn)品開展病毒殺滅效果檢測工作時，會根據(jù)產(chǎn)品實際情況進行病毒滅活分析，病毒滅活效果驗證。
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    病毒滅活試驗病毒懸液的制備：
    1、從液氮中取出凍存的試驗用宿主細胞，在37°C溫水中迅速融化，用毛細吸管移植于含有細胞維持液的細胞管內(nèi)，吹吸數(shù)次，使混勻,立即離心(3000r/min， 3min) ，去上清液。再加入適當?shù)募毎S持液，吹吸數(shù)次，使混勻，同上離心后，轉(zhuǎn)種于加有10完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。逐日觀察細胞生長情況，在細胞長滿單層時，用于消毒試驗。
    2、取出低溫凍存的試驗病毒毒種，37°C水浴融化，用細胞維持液作10倍稀釋，然后接種于已經(jīng)長滿單層細胞的細胞瓶內(nèi)，置37°C溫箱中，使與細胞吸附、生長。逐日觀察病變，待3/4細胞出現(xiàn)病變時，收獲病毒。
    3、將含有病毒及宿主細胞的培養(yǎng)液，在冰浴條件下，用超聲波(或反復凍融)破碎宿主細胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000r/min,15min)去除沉淀(主要為細胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1. 0分裝于無菌離心管(1.5)中。
    4、取1支病毒懸液，按病毒滴度測定法，測定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80°C備用。
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