脫水
①以上各級乙醇脫水時間可根據(jù)組織塊的大小適當(dāng)調(diào)整。對于小的組織塊(如胃黏膜、支氣管粘膜等)可適當(dāng)減少脫水時間,對于較大的組織塊可適當(dāng)增加脫水時間,活體組織切片,但各級乙醇較長不要**過12h,無水乙醇不要**過4h。如中途因故不能繼續(xù)進(jìn)行下去,則可將標(biāo)本退回至80%乙醇中保存。另外,脂肪組織和疏松結(jié)締組織一般應(yīng)延長脫水時間,在95%乙醇中水分必須脫凈,脂肪必須溶解掉(50%以上濃度的乙醇可溶解脂肪和類脂質(zhì))。否則,石蠟不能滲入脂肪細(xì)胞和纖維組織,組織切片圖片,無法切出好的切片,而且染色時也易脫片。
?、谌艚M織含水分過多(如胚胎組織),則脫水劑濃度應(yīng)由較低級乙醇(如30-40%乙醇)開始,這對保證制片質(zhì)量十分重要。
③若脫水不盡,切片后蠟塊切面組織常出現(xiàn)凹陷(因蠟塊中包埋的組織與空氣接觸后即干燥收縮)。這樣的蠟塊,雖能勉強(qiáng)切出切片,但染色效果較差,染色時組織也容易脫落。因此,脫水必須徹底,脫水徹底與否是制片質(zhì)量好壞的一個重要環(huán)節(jié)。
?、苊撍畡┑娜莘e應(yīng)為組織塊總體積的5-10倍,脫水劑應(yīng)及時過濾,更換。
切片組織切片法很多種,石蠟切片是病理診斷較常用的切片制作方法,稱為常規(guī)石蠟切片法,即將經(jīng)石蠟包埋后制成的組織是蠟塊,組織切片,用切片機(jī)制成切片的過程。切片的厚度一般在3-5um,特殊情況,可切1-2um,具體步驟如下:
?、賹⒁研藓?、固定于支持器上(一般為木制品,習(xí)慣成為“木托”),并經(jīng)冷卻的組織塊,安置在切片機(jī)的機(jī)頭處。將切片刀裝在刀架上,調(diào)整刀刃與蠟塊至合適位置,使刀刃與蠟塊呈5o-10o夾角。
?、谧屑?xì)移動刀架或蠟塊支持器,使蠟塊與刀刃接觸,旋緊刀座和蠟塊支持器。
?、凼瓜瀴K的厚度為15-20um,用右手迅速旋轉(zhuǎn)切片機(jī)輪,修切組織塊表面,直到全部暴露組織塊切片為止。但小標(biāo)本不要修的太多,以免將有診斷**的病變修掉。
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