微生物檢測化驗員手指口述操作法

微生物檢測化驗員手指口述操作法

一、本崗位安全環(huán)境描述

我是質保部化驗員＊＊＊，負責產品微生物化驗工作。本崗位儀器設備有電子天平1臺，無菌操作臺1臺，紫外燈2盞，微波爐1臺，電熱恒溫培養(yǎng)箱2臺。

1、電子天平為ALC—1100型：最大稱量范圍為1100g，精確度10mg。

2、電熱恒溫培養(yǎng)箱型號為DNP9082，電源電壓220v，功率300w，調控溫度范圍到65℃。

3、微波爐型號為HR—7103E，電源電壓220v,功率1200w。

二、本崗位操作流程手指口述

備齊試驗所須物品，消毒無菌間（紫外燈照射30分鐘），進入無菌間，更換隔離衣，75%酒精進行手消毒。

1、大腸桿菌檢驗手指口述：

①手指電子備齊天平口述并操作：調整天平水平位置，校準天平。

②手指樣品并口述：稱取25g樣品，放入225ml生理鹽水中，搖勻，制成1：10稀釋液。

③手指吸管并口述：用10ml吸管從1：10稀釋液中吸取10ml注入乳糖膽鹽發(fā)酵管中，共接種三管。再吸取5ml注入含45ml生理鹽水中，制成1：100稀釋液。

④另取1支10ml吸管，從1：100稀釋液中吸取10ml注入發(fā)酵管中，共接種三管，再吸取5ml注入含45ml生理鹽水中，制成1：1000稀釋液。

⑤另取1支10ml吸管，從1：1000稀釋液中吸取10ml注入發(fā)酵管中，共接種三管。

⑥將發(fā)酵管拿出放入恒溫36℃的培養(yǎng)箱內，培養(yǎng)24小時，然后觀察結果。

2、菌落總數(shù)檢驗手指口述：

①手指吸管并口述：取1ml吸管1支，從1：100稀釋液中吸取1ml注入平皿中，共做兩個平皿，另取1ml吸管從1：1000的稀釋液中吸取1ml注入平皿中，共做兩個平皿。

②手指營養(yǎng)瓊脂并口述：將涼至46℃的營養(yǎng)瓊脂注入平皿中，每個注入15ml，轉動平皿，使瓊脂與檢樣混合均勻。

③待瓊脂凝固后，翻轉平皿，將其放入恒溫36℃的培養(yǎng)箱內，培養(yǎng)48小時，然后觀察結果。

3、大腸菌群結果觀察

①手指發(fā)酵管并口述：如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產氣，則報告陰性，如有產氣者，將產氣的發(fā)酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂板上，36℃培養(yǎng)18～24小時，取出，觀察群落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實試驗。

②在上述平板上挑取可疑菌群菌落1～2個，進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，36℃培養(yǎng)24小時，觀察產氣情況，凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。

③報告：根據(jù)陽性管數(shù)，查MPN檢索表，報告大腸菌群數(shù)。

4、菌落總數(shù)報告

①菌落在100以內，按實數(shù)報告，大于100時，取2位有效數(shù)字（4舍5入）報告。

②計數(shù)時應選菌落在30～300之間的平皿，以2者比值決定，比值小于或等于2取平均數(shù)，大于或等于2取較小數(shù)字。

③若所有稀釋度均不在30～300之間，大于300取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告；均小于30，則以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。

④當平皿內菌落過多，但分布均勻時，可取平皿一半或1/4計數(shù)，再乘以相應稀釋倍數(shù)報告。

三、安全預想要訣

1、嚴禁用濕手或濕布觸摸、擦電子天平及其它帶電設備。

2、恒溫箱應放在通風干燥處，遠離易燃易爆物。

3、維修微波爐時，應拔掉主電源，加熱時嚴禁用手接觸表面，以防燙傷。

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