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    一、概述:
    抗Flag (DYKDDDK)*磁珠標簽抗體*磁珠由高性能的特異性 IgG1 單克隆抗體與磁珠共價偶聯(lián),后期經(jīng)過封閉處理,可以直接用于捕獲Flag標簽蛋白,具有較高的Flag標簽融合蛋白結合量以及非特異結合低的特點,可用于Flag標簽蛋白*沉淀以及蛋白的分離純化。
    二、產(chǎn)品規(guī)格:
    配體:抗Flag標簽IgG
    磁珠表層材料:**順磁親水高分子磁珠
    包裝:1ml  5ml
    粒徑大?。?00nm/1μm
    濃度:10mg/ml
    結合量:>10μg/mg磁珠(對Flag標簽蛋白的結合量)
    濃度:10mg/ml
    建議pH使用范圍:1-10
    沉降系數(shù):2mg/ml磁珠在60ul以下體積沉降時間應該不大于10s
    批間差:<5%
    磁珠保存液:含有保護劑的緩沖液,保質(zhì)期兩年。
    保存:4℃,禁止冷凍,使用前請充分混勻三、使用方法:
    1.磁珠的準備
    1.1 用移液槍輕柔吹打重懸Anti-Flag標簽*磁珠,轉移50-100 μL*磁珠到新的離心管中(實際取用量可根據(jù)樣品中目的蛋白的含量適當增減)。
    1.2 加入1ml TBST緩沖液,用移液槍輕柔吹打重懸*磁珠,磁力架上靜置實現(xiàn)磁液分離后, 移除上清,重復上述步驟2次。
    2.樣品的結合
    2.1 加入500 μL細胞裂解液,室溫旋轉混勻孵育2小時或者4°C條件下過夜。
    2.2 磁力架上靜置實現(xiàn)磁液分離后,將上清液轉移到新的離心管中備用(上清液可能還有過量的Flag標簽目的蛋白)。
    3.磁珠洗滌
    3.1 加入1mL TBST緩沖液洗滌磁珠,磁力架上靜置實現(xiàn)磁液分離后, 移除上清。
    3.2 重復洗滌大約3次,直到洗滌后的上清液中OD280小于0.05為止。
    注意:如上清液的OD280大于0.05,適當增加洗滌次數(shù)
    4.目的蛋白洗脫
    4.1 根據(jù)下游用途選擇洗脫方法。對于直接檢測目的蛋白的情況,在上述所得沉淀中加入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,在磁力架上靜置實現(xiàn)磁液分離后,吸取上轉移到新的離心管中。
    4.1 取上清進行SDS-PAGE檢測。

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