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納濾膜分離技術(shù)分離純化多肽和氨基酸蛋白設(shè)備
蛋白質(zhì)水解液和發(fā)酵液中成分相當(dāng)復(fù)雜,其中很多多肽或氨基酸分子量相近、性質(zhì)相似,有的僅是凈電荷數(shù)的不同。分離這些多肽和氨基酸難度較大,通常采用離心、沉淀、吸附、萃取、離子交換和色譜等方法。這些方法普遍存在工藝復(fù)雜、操作時(shí)間長(zhǎng)、原料需求量大、能耗高、收率低、污染嚴(yán)重等問(wèn)題,而且產(chǎn)品在長(zhǎng)時(shí)間提取過(guò)程中容易變性失活。
這將不可避免地給大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)帶來(lái)一系列問(wèn)題。膜分離技術(shù),尤其是超濾膜技術(shù)已經(jīng)用于蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)水解液中酶、多肽以及其他大分子**物的分級(jí)分離。但是分子量相近、物化性質(zhì)相似的多肽很難用超濾膜進(jìn)行分離。
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納濾膜分離技術(shù)則對(duì)多肽和氨基酸的分級(jí)分離具有明顯的優(yōu)勢(shì)。納濾膜具有納米級(jí)孔徑,截留分子量在100-1000Da之間,主要特征是表面帶(正或負(fù))電荷,小分子多肽和氨基酸相對(duì)分子量在100-1000Da都是電解質(zhì),安陽(yáng)縣蛋白設(shè)備,分子中既帶有堿性基團(tuán)(氨基),有帶有酸性基團(tuán)(羥基)。在溶液pH等于它們的等電點(diǎn)時(shí),哪有蛋白設(shè)備,分子呈現(xiàn)電中性,凈電荷為零;在pH偏離等電點(diǎn)時(shí),分子成為帶負(fù)電荷或正電荷的離子。因此,納濾膜通過(guò)空間位阻和電荷效應(yīng)的共同作用就可對(duì)溶液中的多肽和氨基酸進(jìn)行分離。
諸多研究顯示,在一定pH和離子強(qiáng)度下,蛋白的作用,膜與多肽、氨基酸離子間的相互作用程度能明顯影響這些組分的分離效果。利用截留分子量為2500的醋酸纖維素納濾膜對(duì)乳清蛋白胰蛋白水解液中的多肽進(jìn)行分級(jí)分離,結(jié)果表明,在某一酸度、未加氯化鈉的條件下,帶負(fù)電的膜對(duì)正電性多肽的選擇透過(guò)性能**對(duì)負(fù)電性多肽的透過(guò)性能。
此外,納濾膜的高通量、低操作壓力、無(wú)污染也使其成為當(dāng)前膜研究領(lǐng)域中的熱點(diǎn)。
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